Обеспечение инфекционной безопасности препаратов из плазмы крови доноров

Экспериментальное изучение эффективности удаления вирусов гепатитов B, C и парвовируса B19 при фракционировании плазмы крови этиловым спиртом

Обеспечение инфекционной безопасности препаратов из плазмы крови доноров

1. Burnouf T. Modern plasma fractionation.Transfus Med Rev. 2007; 21(2): 101-17.

2. CPMP/BWP/268/95 Virus Validation Studies: the design contribution and interpretation of studies validating the inactivation and removal of viruses. European Medicines Agency. Available from: http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientific_guideline/2009/09/WC500003684.pdf.

3. Зубкова НВ. Обеспечение инфекционной безопасности препаратов из плазмы крови доноров. Гематология и трансфузиология 2014; (2): 44-9.

4. Общая фармакопейная статья «Лекарственные препараты из плазмы крови человека». Приказ Минздрава России № 768 от 21.11.2014. Available from: http://www.rosminzdrav.ru/ministry/61/11/ materialy-po-deyatelnosti-deparatamenta/stranitsa-856/.

5. WHO Guidance document on viral inactivation and removal procedure intended to assure the viral safety of blood plasma products. WHO Technical Report, Series № 924, Annex 4. 2004. Available from: http://www.who.int/bloodproducts/publications/WHO_ TRS_924_A4.pdf?ua=1.

6. Dichtelmüller H, Flechsig E, Sananes F, Kretschmar M, Dougherty C. Effective virus inactivation and removal by steps of Biotest Pharmaceuticals IGIV production process. Results in Immunology 2012; (2): 19-24.

7. Jeong HS, Shin JH, Park YN, Choi JY, Kim YL, Kim BG et al. Development of real-time RT-PCR for evaluation of JEV clearance during purification of HPV type 16 L1 virus- particles. Biologicals 2003; 31(3): 223-9.

8. Blümel J, Burger R, Drosten C, Gröner A, Gürtler L, Heiden M et al. Parvovirus B19-Revised. Transfus Med Hemother. 2010; 37(6): 339-50.

9. Филатова ЕВ, Зубкова НВ, Новикова НА, Голицына ЛН, Кузнецов КВ. Выявление маркеров парвовируса B19 в образцах крови доноров. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2010; (5): 67-70.

10. Бельгесов НВ, Вильянинов ВН, Романенко СМ, Тихменева ИБ, Попова НН. Динамика выявления маркеров гемотрансмиссивных инфекций при обследовании первичных доноров в подразделении службы крови военно-медицинской академии в течение последних 13 лет. Вестник гематологии 2014; X(4): 6-7.

11. Human Plasma (pooled and treated for virus inactivation). 2007: 1646. European Pharmacopoeia. 6st ed. 2007. Available from: http://www.dandybooksellers.com/acatalog/European Pharmacopoeia Supplement 6.1 Book.html.

1. Burnouf T. Modern plasma fractionation.Transfus Med Rev. 2007; 21(2): 101-17.

2. CPMP/BWP/268/95 Virus Validation Studies: the design contribution and interpretation of studies validating the inactivation and removal of viruses. European Medicines Agency. Available from: http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientific_guideline/2009/09/WC500003684.pdf.

3. Зубкова НВ. Обеспечение инфекционной безопасности препаратов из плазмы крови доноров. Гематология и трансфузиология 2014; (2): 44-9.

4. Общая фармакопейная статья «Лекарственные препараты из плазмы крови человека». Приказ Минздрава России № 768 от 21.11.2014. Available from: http://www.rosminzdrav.ru/ministry/61/11/ materialy-po-deyatelnosti-deparatamenta/stranitsa-856/.

5. WHO Guidance document on viral inactivation and removal procedure intended to assure the viral safety of blood plasma products. WHO Technical Report, Series № 924, Annex 4. 2004. Available from: http://www.who.int/bloodproducts/publications/WHO_ TRS_924_A4.pdf?ua=1.

6. Dichtelmüller H, Flechsig E, Sananes F, Kretschmar M, Dougherty C. Effective virus inactivation and removal by steps of Biotest Pharmaceuticals IGIV production process. Results in Immunology 2012; (2): 19-24.

7. Jeong HS, Shin JH, Park YN, Choi JY, Kim YL, Kim BG et al. Development of real-time RT-PCR for evaluation of JEV clearance during purification of HPV type 16 L1 virus- particles. Biologicals 2003; 31(3): 223-9.

8. Blümel J, Burger R, Drosten C, Gröner A, Gürtler L, Heiden M et al. Parvovirus B19-Revised. Transfus Med Hemother. 2010; 37(6): 339-50.

9. Филатова ЕВ, Зубкова НВ, Новикова НА, Голицына ЛН, Кузнецов КВ. Выявление маркеров парвовируса B19 в образцах крови доноров. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2010; (5): 67-70.

10. Бельгесов НВ, Вильянинов ВН, Романенко СМ, Тихменева ИБ, Попова НН. Динамика выявления маркеров гемотрансмиссивных инфекций при обследовании первичных доноров в подразделении службы крови военно-медицинской академии в течение последних 13 лет. Вестник гематологии 2014; X(4): 6-7.

11. Human Plasma (pooled and treated for virus inactivation). 2007: 1646. European Pharmacopoeia. 6st ed. 2007. Available from: http://www.dandybooksellers.com/acatalog/European Pharmacopoeia Supplement 6.1 Book.html.

Page 3

Выйти из полноэкранного режима Полноэкранный режим

Зубкова Н.В., Кузнецова М.М., Зубов С.В., Филатова Е.В., Опалева М.Ю. Экспериментальное изучение эффективности удаления вирусов гепатитов B, C и парвовируса B19 при фракционировании плазмы крови этиловым спиртом. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2016;16(1):43-48.

For citation:

Zubkova N.V., Kuznetsova M.M., Zubov S.V., Filatova E.V., Opaleva M.Yu. Experimental study of the effectiveness of the removal of virus hepatitis B, C and parvovirus B19 by the fractionation of blood plasma with ethanol. BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2016;16(1):43-48. (In Russ.)

117

Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License. ISSN 2221-996X (Print)ISSN 2619-1156 (Online)

Page 4

Том 16, № 1 (2016)

ISSN 2221-996X (Print)ISSN 2619-1156 (Online)

Источник: https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/40

Плазма крови доноров: обеспечение инфекционной безопасности

Обеспечение инфекционной безопасности препаратов из плазмы крови доноров

Плазма крови человека является уникальным биологическим материалом и имеет весьма сложный состав. Она содержит большое количество различных по составу и свойствам биологически активных соединений, играющих важную роль в выполнении ряда жизненных функций и процессов в организме.

Белки — наиболее ценные составляющие плазмы крови, некоторые из них получают промышленным способом и используют в качестве лекарственных средств для лечения тяжелых заболеваний и повреждений, связанных с кровотечением и тромботическими расстройствами, иммунологическими, онкологическими, инфекционными и дегенеративными заболеваниями.

Чрезвычайно важна роль гемокомпонентной терапии при ликвидации последствий катастроф природного и техногенного характера. Однако использование компонентов крови сопряжено с определенными рисками, связанными в том числе, с возможностью контаминации вирусами и бактериями.

Контаминация (заражение, загрязнение) плазмы крови (используемой для получения лекарственных средств) может быть как эндогенного, так и экзогенного характера.

Эндогенная контаминация происходит при получении плазмы от инфицированных лиц, при этом лишь небольшое число возбудителей присутствует в плазме крови в свободном виде, как правило, патогены локализованы в различных органах, тканях и клеточных элементах крови.

Экзогенная контаминация может возникать при нарушении правил заготовки, хранения плазмы крови, при разгерметизации контейнеров. Роль патогенных агентов в развитии посттрансфузионных осложнений вследствие применения препаратов крови неоднозначна.

Простейшие, грибы, бактерии легко удаляются из растворов посредством микрофильтрации в процессе производства, что делает их актуальными только при переливании пациентам свежезамороженной плазмы (СЗП).

Случаев прионных заболеваний (болезнь Крейтцфельдта — Якоба и губчатая энцефалопатия крупного рогатого скота) после применения препаратов крови официально пока не зарегистрировано. В связи с этим наибольшую озабоченность специалистов по-прежнему вызывают вирусы. Практически у всех мировых производителей имелись случаи выпуска на рынок препаратов, загрязненных вирусами гепатитов С, В или парвовирусом В19. Кроме того, опасность могут представлять новые инфекционные агенты, роль которых в развитии посттрансфузионных осложнений пока не изучена.

Первый уровень безопасности сырья для изготовления лечебных препаратов (например, альбумины, иммуноглобулины, факторы свертывания крови, протеин С, церулоплазмин и др.) обеспечивается в учреждениях Службы крови на этапе заготовки плазмы крови от доноров. Он включает:

     эпидемиологический надзор за населением;
     идентификацию и отбор доноров путем опроса, анкетирования, собеседования;
     тестирование образцов плазмы на маркеры наиболее актуальных инфекций;
     карантинизацию — хранение плазмы крови с последующим повторным обследованием донора.

Для выявления возбудителей инфекционных заболеваний у доноров крови разработаны различные аналитические системы, которые позволяют обнаруживать в плазме крови:

     антитела, указывающие на формирование иммунной реакции в ответ на внедрение возбудителя;
     антигены, продуцируемые возбудителем и свидетельствующие о его наличии;
     нуклеиновые кислоты (РНК/ДНК).

Перечень обязательных тестов на маркеры инфекционных заболеваний при исследовании донорской плазмы неодинаковый в разных странах мира. В РФ у доноров определяют антитела к вирусу гептита С — ВГС (анти-ВГС), антитела к ВИЧ 1-го и 2-го типов (анти-ВИЧ 1, 2) и антиген р24, поверхностный антиген вируса гепатита В — ВГВ (НВsAg), антитела к Treponema pallidum (анти-паллидум). В последние годы донорскую плазму дополнительно исследуют на РНК ВГС, РНК ВИЧ и ДНК ВГВ с применением молекулярно-генетических методов. Дополнительными мерами безопасности и контроля качества при получении плазмы (для следующего этапа изготовления лечебных препаратов – фракционирования) являются: замораживание (минус 20°С) в течение 24 — 72 часов после сбора, высокая скорость замораживания, постоянная температура хранения, мониторинг и регистрация температуры.

Второй уровень безопасности для изготовления лечебных препаратов, изготовленных на основе плазмы крови доноров, обеспечивается на предприятиях по фракционированию.

В соответствии с международной практикой плазмой для фракционирования называется донорская плазма, которая предназначена для объединения в производственный пул с целью получения лечебных препаратов.

Плазма для фракционирования представляет собой жидкую часть крови из индивидуальных порций, отделенную от форменных элементов центрифугированием или методом плазмафереза в присутствии антикоагулянта, полученную от здоровых доноров и предназначенную для объединения в производственный пул. Применяют только индивидуальные порции плазмы, соответствующие требованиям по качеству и безопасности. В стартовые пулы обычно включают от 1000 до 10000 донаций.

На предприятиях по фракционированию также осуществляется тестирование мини-пулов (на наличие РНК ВИЧ, ДНК ВГВ, РНК ВГС, РНК ВГА, В19V и других маркеров инфекционных агентов по решению компетентных органов) и тестирование производственного пула (анти-ВИЧ 1,2, анти-ВГС, HBsAg, РНК ВГС и другие маркеры в соответствии с регулирующими документами). Требования к плазме для фракционирования регламентируются в рабочем документе — плазма-мастер файле (PMF — Plasma Master File). Это автономный документ, который разрабатывается каждым учреждением, фракционирующим плазму. В нем сконцентрирована вся необходимая информация (директивы, научные рекомендации, монографии Европейской фармакопеи, документы ВОЗ и Европейкого агентства по оценке медицинских продуктов), касающаяся качества донорской плазмы, определены требования к поставщикам, методам заготовки, хранению плазмы, регламентированы методы контроля в формате индивидуальных донаций, мини-пулов и производственного пула. Программы таких исследований регулируются национальными контрольными органами, они фактически определяют риск контаминации и возможный уровень патогенной нагрузки в сырье для производства препаратов крови. Современная схема эффективной и безопасной переработки плазмы крови доноров:

[смотреть подробную схему безопасного получения лечебных препаратов из плазмы крови доноров]

В целом современный технологический процесс производства препаратов из плазмы крови доноров должен включать, как минимум, две эффективных стадии вирусной редукции, причем одна из них должна быть эффективна против безоболочечных вирусов. В соответствии с рекомендациями ВОЗ и Европейского агентства по оценке медицинских продуктов стадия вирусной редукции считается эффективной, если она обеспечивает редукцию патогенов в 10*4 раз и более.

В производстве препаратов из плазмы крови применяют следующие виды хроматографии: гель-фильтрацию, ионообменную хроматографию, гидрофобную хроматографию, высокоэффективную жидкостную хроматографию, аффинную хроматографию. Как правило, применяют ионообменную хроматографию, реже — гель-фильтрацию и аффинную хроматографию. Гидрофобную хроматографию используют только для очистки от низкомолекулярных соединений, например вирус-инактивирующих реагентов. Все без исключения хроматографические процессы обеспечивают редукцию инфекционных агентов, освобождение от которых происходит за счет фракционного отделения и сорбции их на носителях. Многие продукты подвергают дополнительным стадиям очистки, включая фильтрацию и лиофилизацию. Они повышают качество препаратов и их стабильность в процессе хранения. Значение фильтрации (микро-, ультра-, глубинной) в вирусной редукции существенно меньше, но корректное интегрирование этих стадий в технологический процесс и соблюдение правил GMP на всех этапах производства вносят дополнительный вклад в безопасность готовых продуктов. Для гарантии вирусной безопасности в современном производстве применяют специальные технологические приемы — дополнительные стадии инактивации вирусов: пастеризацию (прогрев растворов при температуре 60С), термическую обработку лиофилизированных продуктов (прогрев при температуре от 60 до 80°С при экспозиции до 72 ч, обработку паром при 60°С в течение 10 ч или при 80°С в течение 1 ч), обработку сольвент-детергентом (смесью трибутилфосфата с холатом натрия, тритоном, твином или другим детергентом), каприловой кислотой или каприлатом натрия, -пропиолактоном, инкубацию при низком значении рН (от 4,0 до 4,25 для иммуноглобулинов, от 4,0 до 5,0 для некоторых других препаратов), обработку гидролитическими ферментами (пепсином, папаином). Традиционно применяют пастеризацию, тепловую обработку лиофилизированных продуктов, сольвент-детергентную обработку. Более 80% препаратов крови производят с использованием этих стадий. Особое внимание в настоящее время уделяется нанофильтрации — технологии удаления вирусов и других патогенных агентов с использованием специальных фильтров. Фильтры Планова («Asahi Chemical Industries Ltd.», Япония) с размерами пор от 15 до 75 нм занимают сегодня лидирующие позиции на рынке. Фильтрующий материал Планова состоит из полых волокон, имеющих ячеистую структуру. Когда белковый раствор с потенциальным загрязнением проникает внутрь волокон, он хорошо проходит сквозь мельчайшие поры, в то время как вирусы и другие патогены задерживаются в трехмерных пустотах и капиллярах. Нанофильтрация не влияет на физико-химические свойства препаратов и может быть полезной для удаления вирусов, которые не инактивируются с помощью химических методов. Для повышения эффективности фильтрацию проводят под высоким давлением. Практически все современные технологические схемы производства препаратов крови включают нанофильтрацию. Эта технология валидирована в лабораторных условиях на модельных вирусах. Кроме лицензированных методов инактивации вирусов в последние годы появились сообщения о разработке принципиально новых подходов, например, с использованием алкилирующих соединений, рибофлавина, псораленов, фотосенсибилизирующих агентов, аминокислот. Однако их внедрение в промышленное производство сдерживается из-за недостаточности сведений о возможном негативном влиянии этих веществ на качество и клиническую переносимость препаратов.

Таким образом, современные технологические процессы позволяют последовательным и интегрированным способом выделять вначале неочищенные фракции, затем очищать их с получением индивидуальных лечебных продуктов.

Этот сложный промышленный процесс осуществляют на лицензированных предприятиях по фракционированию плазмы, работающих в соответствии с принципами надлежащей производственной практики (GMP).

Система обеспечения качества, действующая на этих предприятиях, гарантирует, что все критические процессы, такие как приобретение исходных материалов, заготовка донорской плазмы, хранение, тестирование, формирование производственных пулов, производственные стадии контролируются, чтобы гарантировать соответствие конечного продукта разработанным спецификациям.

Источник: https://doctorspb.ru/articles.php?article_id=3181

Хороший врач
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: